Cadeia de Transporte de Eletrões (ETC)

Estrutura das Mitocôndrias

• Mitocôndria:
  • Organelos de membrana dupla
  • Gera energia para a célula na forma de trifosfato de adenosina (ATP)
  • Fornece sinais importantes para o corpo e auxiliam na diferenciação celular e morte celular
• Membranas internas e externas envolvem as mitocôndrias:
  • Compostas por uma bicamada fosfolipídica e proteína
  • Membrana interna:
    • Contém proteínas que geram reações necessárias para a ETC (por exemplo, ATP sintase).
    • Possui invaginações chamadas cristas, que abrigam complexos respiratórios
    • Cristas são dobras que aumentam a área de superfície da membrana interna e efetivamente aumentam a capacidade respiratória das mitocôndrias.
    • A membrana interna é permeável apenas ao O₂ , CO₂ e H₂O.
  • Matriz: espaço dentro da membrana interna
    • Local de proteínas importantes: enzimas e intermediários do ciclo do ácido cítrico e oxidação do piruvato
    • Contém o genoma do DNA mitocondrial
    • O ADP e o fosfato inorgânico (P _i ) são especificamente transportados para a matriz à medida que o ATP recém-sintetizado é transportado para fora.
  • Membrana externa: contém porinas que permitem a difusão de iões e metabolitos
    • A passagem de metabolitos, como ATP, ADP, ião cálcio (Ca²⁺) e fosfato é um processo mediado por proteínas de transporte:
      • Armazena canais aniónicos dependentes de voltagem, que permitem o trânsito de nucleotídeos e iões
      • Permite a geração de gradientes de iões
    • Transportadores específicos carregam piruvato, ácidos gordos e aminoácidos ou os seus alfa-ceto derivados na matriz para acesso à maquinaria do ciclo do ácido cítrico.
  • Espaço intermembranar: entre as membranas externa e interna
    • Contém as mesmas pequenas moléculas que estão presentes no citosol
    • Região controlada com diferentes grandes proteínas que são reguladas pela membrana externa

Complexos da ETC

Complexo I

• NADH: ubiquinona oxidorredutase
• O complexo enzimático move 2 eletrões do NADH para um carregador (ubiquinona) através de uma reação “redox” que desloca 4 protões.
• Os protões são bombeados da matriz para o espaço intermembranar.

Complexo II

• Succinato desidrogenase
• Entrega eletrões para o pool de quinona
• Transfere FAD para quinona

Complexo III

• Coenzima Q-citocromo c redutase
• 4 protões translocados para o espaço intermembranar
• Complexo inibido por dimercaprol

Complexo IV

• Citocromo c oxidase
• 4 eletrões transferidos para O₂ e produzem 2 moléculas de H₂O.
• 8 protões adicionados ao gradiente de protões

Transporte de Elétrons

• Membrana mitocondrial interna:
  • Principalmente impermeável a moléculas e iões, como iões de hidrogénio (H⁺)
  • Separa os intermediários e enzimas das vias metabólicas no citosol daqueles que ocorrem na matriz mitocondrial
  • Contém cofatores que foram reduzidos ao longo das vias catabólicas que ocorrem em diferentes compartimentos celulares
  • Carrega o compartimento da cadeia respiratória e a ATP sintase
• Matriz mitocondrial:
  • Contém as enzimas do complexo piruvato desidrogenase
  • Também contém as enzimas do ciclo do ácido cítrico, a via de beta-oxidação de ácidos gordos e outras vias envolvidas na oxidação de aminoácidos.
• Aqui, o transporte de eletrões através de 3 complexos respiratórios é acoplado ao bombeamento exterior de protões.

Fosforilação Oxidativa

• A ETC está ligada à fosforilação oxidativa através do gradiente de protões.
• A ATP sintase aproveita o gradiente de protões através da fosforilação oxidativa para gerar ATP:
  • A ATP sintase funciona como um canal iónico para os protões retornarem à matriz mitocondrial.
  • A energia é gerada pelo fluxo de protões, usado para a síntese de ATP.
• Existem várias maneiras de gerar ATP:
  • Glicolise:
    • São produzidos 2 ATP durante a glicólise.
    • São reduzidos 2 NAD⁺ a NADH.
    • 2 moléculas de piruvato são então usadas para produzir 2 moléculas de Acetil-CoA pela piruvato desidrogenase, que produz 1 NADH cada.
    • 2 Moléculas de acetil-CoA entram no ciclo do ácido cítrico, onde se condensam com oxaloacetato e geram:
      • 2 trifosfatos de guanosina (GTP), convertidos em 2 ATPs
      • 6 NADH
      • 2 FADH₂
• A ETC é crucial para configurar o gradiente de protões:
  • Cada NADH entra na cadeia de transporte de eletrões no complexo I, onde é reoxidado e passa os seus eletrões para a CoQ.
  • Os eletrões fluem da CoQ para o complexo III, que os retransmite através do citocromo c para o complexo IV.
  • Aqui, são aceites pelo O₂.
  • Tanto o complexo I quanto o complexo III transportam 4 protões cada um para o espaço intermembranar, enquanto o complexo IV bombeia 2 para o espaço membranar por cada par de eletrões.
  • 6 NADH produzidos durante o ciclo do ácido cítrico geram 60 protões no espaço intermembranar.
• 2 ATP gerados durante a glicólise e 2 produzidos no ciclo do ácido cítrico

Controlo da Fosforilação Oxidativa

• Existem mecanismos de regulação importantes para controlar a taxa de glicólise, o ciclo do ácido cítrico, a oxidação do piruvato e a fosforilação oxidativa pelas concentrações relativas:
  • ATP
  • ADP
  • AMP
  • NADH
• A glicólise, a degradação de ácidos gordos e o ciclo do ácido cítrico constituem as fontes primárias de eletrões que entram na ETC mitocondrial.
• O controlo da glicólise e do ciclo do ácido cítrico é coordenado com a necessidade de fosforilação oxidativa.
• A fosforilação oxidativa é mantida pelos requisitos de energia celular:
  • O ADP intracelular e o ATP são medidas do estado de energia de uma célula.
  • Um suprimento adequado de eletrões para alimentar a cadeia de transporte de eletrões é fornecido pela regulação dos pontos de controlo da glicólise e do ciclo do ácido cítrico pelo NADH e metabolitos:
    • Fosfofrutoquinase (PFK, pela sigla em inglês)
    • Piruvato desidrogenase
    • Citrato sintase
    • Isocitrato desidrogenase (IDH, pela sigla em inglês)
    • Alfa-cetoglutarato desidrogenase
• O bloqueio do ciclo do ácido cítrico e a glicólise pelo citrato, que dificulta a glicólise, facilita o modo de ação do sistema de nucleotídeos da adenina:
  • Níveis aumentados de NADH e acetil-CoA impedem a oxidação do piruvato em acetil-CoA.
  • Uma alta relação NADH/NAD⁺ dificulta as reações de desidrogenase no ciclo do ácido cítrico.
• Outro efeito regulador importante é a inibição de PFK pelo citrato:
  • Quando a necessidade de ATP diminui, o ATP aumenta e o ADP diminui.
  • Como o ADP ativa a IDH e o ATP inibe a alfa-cetoglutarato desidrogenase, o ciclo do ácido cítrico diminui.
  • A desaceleração leva a uma acumulação da concentração de citrato.
  • O citrato deixa a mitocôndria através de um sistema de transporte específico e, uma vez no citosol, atua para conter a degradação de hidratos de carbono, inibindo a PFK.