Estuda onde quiseres
A Lecturio Medical complementa o teu estudo através de métodos de ensino baseados em evidência, vídeos de palestras, perguntas e muito mais – tudo combinado num só lugar e fácil de usar.
As técnicas de blotting envolvem a separação (via eletroforese) e a transferência de ADN, ARN ou proteínas para uma membrana de blotting. O ADN alvo é depois ligado a uma molécula com o objetivo de auxiliar a sua deteção. O Southern blotting é usado para avaliar sequências de ADN específicas e pode ser usado na identificação de mutações genéticas e na medicina forense. O Northern blotting concentra-se nas sequências de ARN e é útil na avaliação da expressão génica. O Western blotting identifica proteínas e anticorpos e possui aplicações no diagnóstico de doenças infeciosas, alterações de proteínas (como na doença priónica) e condições autoimunes. Embora estes testes possuam uma boa especificidade, têm desvantagens significativas devido ao seu custo, ser trabalhoso e tempo de resposta lento.
Last updated: Dec 15, 2025
Blotting é uma técnica de investigação usada para detetar e identificar macromoléculas, como os ácidos nucleicos e as proteínas. Esta técnica é realizada por:
Os 4 tipos básicos de blotting são
| Técnica | Southern blot | Northern blot | Western blot |
|---|---|---|---|
| Alvo | Sequências de ADN | Sequências de RNA RNA A polynucleotide consisting essentially of chains with a repeating backbone of phosphate and ribose units to which nitrogenous bases are attached. RNA is unique among biological macromolecules in that it can encode genetic information, serve as an abundant structural component of cells, and also possesses catalytic activity. RNA Types and Structure | Proteína |
| Separação | Eletroforese | Eletroforese | Eletroforese |
| Método de blotting | Transferência capilar | Transferência capilar | Transferência eletroforética |
| Sonda | Oligonucleotídeos | Oligonucleotídeos | Anticorpos |
| Métodos comuns de deteção |
|
|
|
Todas as técnicas de blotting usam eletroforese, que envolve o uso de um campo elétrico para separar as moléculas.
As técnicas de blotting seguem um procedimento geral:
Procedimento para o Southern blotting:
A: O ADN é clivado com enzimas de restrição e separado por eletroforese.
B: Os fragmentos de ADN são transferidos para um filtro de nitrocelulose.
C: O filtro é exposto a uma solução que contém uma sonda radiomarcada, permitindo a hibridização com sequências de ADN alvo.
D: As bandas no filtro são então expostas ao filme de raios-X para visualização.
Procedimento para o Western blotting:
A: As amostras de proteínas são carregadas num gel e separadas por eletroforese.
B: As proteínas separadas são transferidas eletroforeticamente para uma membrana.
C: A membrana é incubada com um anticorpo primário específico para a proteína alvo, que permite a formação de complexos anticorpo-antigénio.
D: A membrana é incubada novamente com anticorpos secundários marcados, que se ligam aos anticorpos primários.
E: Neste caso, é adicionado um substrato que interage com os marcadores, permitindo a deteção por quimioluminescência.
SDS-PAGE, pela sigla em inglês: eletroforese em gel de dodecil sulfato de sódio-poliacrilamida
Western blotting de Borrelia burgdorferi:
A, B e C: Controlos positivos para anticorpos monoclonais específicos
D e E: Indivíduos seropositivos para IgM
F: Controlo positivo
G: Controlo negativo
H: Controlo branco (solução salina tamponada com fosfato)
MW, pela sigla em inglês: peso molecular
O Northern blotting Northern blotting Detection of RNA that has been electrophoretically separated and immobilized by blotting on nitrocellulose or other type of paper or nylon membrane followed by hybridization with labeled nucleic acid probes. Blotting Techniques pode ser usado para avaliar os níveis de ARN e a expressão génica.
Identificação de anticorpos:
USMLE™ is a joint program of the Federation of State Medical Boards (FSMB®) and National Board of Medical Examiners (NBME®). MCAT is a registered trademark of the Association of American Medical Colleges (AAMC). NCLEX®, NCLEX-RN®, and NCLEX-PN® are registered trademarks of the National Council of State Boards of Nursing, Inc (NCSBN®). None of the trademark holders are endorsed by nor affiliated with Lecturio.
Cadastre-se agora e tenha acesso grátis ao Lecturio, com páginas de conceitos, vídeos de medicina e questões para sua educação médica.
Complementa o teu estudo da faculdade com o companheiro de estudo tudo-em-um da Lecturio, através de métodos de ensino baseados em evidência.
A Lecturio Medical complementa o teu estudo através de métodos de ensino baseados em evidência, vídeos de palestras, perguntas e muito mais – tudo combinado num só lugar e fácil de usar.